***系统模型制作RNA水平

实验动物的给法

(一)***给药法

1. 皮射 ***时用左手拇指及食指轻轻捏起皮肤，右手持将针头刺入,固定后即可进行***。一般小鼠在背部或前肢腋下，大鼠在背部或侧下腹部；豚鼠在后大腿内侧、背部等脂肪少的部位；兔在背部或耳根部***；蛙可在脊背部淋巴囊***；狗多在大腿外侧***，拔针时，轻按片刻，防药液逸出。

2. 皮内*** 此法用于观察皮肤血管的通透性变化或观察皮内反应。 如将一定量的性同位素溶液、颜料或致炎物质、等注入皮内，观察其消失速度和局部血液循环变化，作为皮肤血管通透性观察指标之一。方法是：将动物***部位的毛剪去，消毒后，用皮试针头紧贴皮肤皮层刺入皮内，然后使针头向上挑起并再稍刺入，即可***药液。***后可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。

3. 肌肉*** 当给动物***不溶于水而混悬于油或其他溶剂中的时,常采用肌肉***。肌肉***一般选用肌肉发达、无大血管经过的部位，多选臀部。

***时针头要垂直快速刺入肌肉，如无回血现象即可***。给大、小鼠作肌肉***时，选大腿外侧肌肉进行***。

4. 腹腔*** 先将动物固定,腹部用酒精棉球擦试消毒，然后在左或右侧腹部将针头刺入皮下，沿皮下向前推进约0.5厘米，再使针头与皮肤呈45 度角方向穿过腹肌刺入腹腔，此时有落空感，回抽无肠液、尿液后，缓缓推入药液。此法大小鼠用的较多。

5. 静脉*** 是将药液直接***于静脉管内，使其随着血液分布全身,迅速奏效。但排泄较快，作用时间较短。

小鼠、大鼠的静脉***：常采用尾静脉***。鼠尾静脉共有3根， 左右两侧和背侧各1根，两侧尾静脉比较容易固定，故常被采用。操作时，先将动物固定在暴露尾部的固定器内(可用烧杯、铁丝罩或粗试管等物代替),用75％酒精棉球反复擦试使血管扩张, 并可使表皮角质软化，以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧，使静脉充盈,***时针头尽量采取与尾部平行的角度进针。

小鼠关节yan模型

根据tong风性关节yan发生的特点，模型构建一般采用踝关节或膝关节***尿酸钠（MSU）的方法。尿酸钠是一种白色略带***的粉末，在体内常沉积于关节和shen脏中，被认为和tong风性关节yan的发病有关，通过***尿酸钠可认为模拟关节损伤过程，造成关节yan症。

Step2：将25mg/ml的尿酸钠乳浊液***到大鼠踝关节腔处

Step3：轻轻活动大鼠踝关节使yao物均匀分布在关节腔中

Step4：实验过程中观察大鼠步态，测量踝关节周长

Step5：实验结束后处死大鼠，取踝关节软gu做进一步检测

实验动物大、小鼠的采血方法

1、动物实验中剪尾采血：需血量少时可用此方法。将动物固定，显露尾部，将尾尘剪去约5mm，从尾根部向尾端部，血即从断端流出。若用二棉球涂擦尾部或事先将鼠尾浸在45℃水中数分钟，使尾部血管充盈，可采到较多的血，但注意二可致溶血。也可用锋利刀片割破尾动脉或尾静脉，让血液自行流出，采血后，消毒，止血。如将动物取血量可更多些。小鼠每次采血约0.1ml，大鼠约0.4 ml。为了多次反复取血应尽量从鼠尾末端开始。

2、动物实验中摘眼球采血：此法常用于鼠类大量采血。用左手固定动物，压迫眼球，尽量使眼球突出，右手用无钩弯镊子或弯止血钳迅速摘除眼球，立即将鼠倒置，头朝下，眼眶内很快流出血液。一般只适用于一次采血。大部动物采血后可以存活，可采另一侧眼球取血。

大鼠后眼框静脉丛取血方法

4、动物实验中颈静脉或颈动脉采血：将鼠，剪去一侧颈部外侧被毛，作颈静脉或颈动脉分离***，用即可抽出所需血量。也可插入导管，反复采血。

5、断头采血：操作者左手拇指和食指握住鼠颈部，头朝下，用利剪在头颈间1/2处迅速剪动物头部，提起动物，血液即可流入准备好的容器中。

6、心脏采血：将动物，使其仰位固定，剪去胸前区毛，消毒皮肤，在左侧第3—4肋间选择心博强处穿刺，血液借心脏跳动的力量进入。亦可在动物后，切开动物胸腔，直视心脏内抽血或剪破心脏，直接用、吸管等吸血。

血管钙化大鼠模型

方法:将16只雄性SD大鼠随机分为正常组和钙化组,每组8只,4周后取材检测血管钙化程度,用钙离子测试盒、碱性磷酸酶(ALP)***盒测定大鼠主动脉钙含量和ALP活性,用放she免yi法检测大鼠血浆和主动脉***salusin-a含量结果与对照组比较,钙化组大鼠主动脉中膜弹性纤维间可见钙盐沉积,血浆和主动脉***中ALP、钙含量明显升高(P lt; 0.01),salusin-a的表达明显降低(P lt;0.01).结论血管钙化大鼠模型salusin-a的表达下调.